Calculateur de comptage cellulaire (hémocytomètre)
Rédigé par Thierno Sadou Diallo, formule vérifiée selon notre méthodologie • Mis à jour le 16/08/2026
La concentration cellulaire se calcule avec (cellules comptées ÷ carrés comptés) × facteur de dilution × 10⁴. Pour 200 cellules comptées sur 4 grands carrés, avec une dilution au 1:2, la concentration est de 1 000 000 cellules/mL.
Explication
L'hémocytomètre (couramment appelé cellule de Neubauer, ou cellule de Malassez selon le modèle) est l'outil de référence pour compter manuellement des cellules en suspension au microscope, malgré la généralisation des compteurs automatiques dans de nombreux laboratoires. Sa grille gravée délimite des carrés de volume connu avec précision : un grand carré d'angle correspond à un volume de 0,1 mm³, soit 10⁻⁴ mL. C'est cette constante géométrique, propre à l'instrument et non à l'échantillon, qui explique le facteur 10⁴ dans la formule : elle convertit un nombre de cellules comptées dans un volume minuscule en une concentration par millilitre, l'unité habituellement utilisée pour exprimer la densité d'une culture cellulaire. Le facteur de dilution doit également être pris en compte lorsque l'échantillon a été dilué avant comptage, généralement avec du bleu trypan, un colorant qui permet aussi de distinguer les cellules vivantes des cellules mortes (seules les cellules mortes, à la membrane endommagée, absorbent le colorant) — ce calculateur suppose que seules les cellules pertinentes (vivantes, ou totales selon le protocole) ont été comptées. Pour limiter l'erreur d'échantillonnage, il est recommandé de compter plusieurs grands carrés (généralement les 4 carrés d'angle) et d'utiliser leur moyenne plutôt qu'un seul carré. Pour amplifier une séquence d'intérêt avant culture, voir notre calculateur d'amplification PCR ; pour évaluer un taux de croissance à partir de plusieurs comptages successifs, notre calculateur de taux de croissance d'une population.
Exemple : 200 cellules comptées sur 4 grands carrés, dilution au 1:2
Données d'entrée
Cellules comptées : 200. Carrés comptés : 4. Dilution : ×2.
Calcul
Moyenne par carré = 200 ÷ 4 = 50 cellules. Concentration = 50 × 2 × 10⁴ = 1 000 000 cellules/mL.
Résultat
La concentration de cette culture est d'environ 1 000 000 (1 × 10⁶) cellules par mL.
Questions fréquentes
Pourquoi compter plusieurs carrés plutôt qu'un seul ?
Parce que la répartition des cellules dans la chambre n'est jamais parfaitement homogène : compter un seul carré expose à une erreur d'échantillonnage importante, surtout si peu de cellules y sont présentes. Compter les 4 grands carrés d'angle et utiliser leur moyenne (comme le fait ce calculateur via le nombre total de cellules divisé par le nombre de carrés) réduit sensiblement cette variabilité.
Que faire si le nombre de cellules comptées est très différent d'un carré à l'autre ?
Un écart important entre carrés (généralement au-delà de 10-20 % de variation autour de la moyenne) est le signe d'une distribution inégale des cellules dans la chambre, souvent due à un mauvais mélange de l'échantillon avant chargement ou à une bulle d'air. Dans ce cas, il est recommandé de recharger la chambre après avoir remélangé soigneusement l'échantillon plutôt que de se fier à un comptage peu fiable.
Ce calcul donne-t-il uniquement les cellules vivantes ?
Cela dépend uniquement de ce qui a été compté au microscope, pas de la formule elle-même. Avec une coloration au bleu trypan, les cellules mortes apparaissent bleues (colorant absorbé) tandis que les cellules vivantes restent claires (membrane intacte) : il faut donc décider, avant de compter, si l'on souhaite le nombre de cellules vivantes, de cellules totales, ou calculer un pourcentage de viabilité séparément.