Calculateur de concentration d'ADN ou d'ARN (A260)
Rédigé par Thierno Sadou Diallo, formule vérifiée selon notre méthodologie • Mis à jour le 15/08/2026
La concentration d'un acide nucléique se calcule avec A260 × facteur de conversion × facteur de dilution. Pour de l'ADN double brin (facteur 50) avec une absorbance de 0,5 mesurée sans dilution, la concentration est de 25 ng/µL.
Explication
La mesure de concentration d'ADN ou d'ARN par spectrophotométrie UV repose sur le même principe que la loi de Beer-Lambert : l'absorbance à 260 nm (longueur d'onde à laquelle les bases nucléiques absorbent fortement la lumière UV) est proportionnelle à la concentration de l'échantillon. En pratique de laboratoire, cette relation est simplifiée en trois facteurs de conversion standards, propres à chaque type d'acide nucléique : une unité d'absorbance à 260 nm correspond à environ 50 µg/mL pour de l'ADN double brin, 40 µg/mL pour de l'ARN, et 33 µg/mL pour de l'ADN simple brin, toujours sur un trajet optique de référence de 1 cm (le format standard des appareils de type NanoDrop, qui ajustent automatiquement une mesure sur trajet plus court à cette référence). Si l'échantillon a été dilué avant la mesure, il suffit de multiplier le résultat par le facteur de dilution pour retrouver la concentration de l'échantillon d'origine. Cette méthode reste rapide et peu coûteuse, mais elle ne distingue pas l'ADN ou l'ARN d'autres substances qui absorbent aussi vers 260 nm (protéines, phénol résiduel, sels) : le ratio A260/A280 (indicateur de pureté classique, non calculé ici) permet de détecter une contamination probable si la mesure de concentration semble incohérente avec le protocole d'extraction utilisé.
Exemple : ADN double brin, A260 = 0,5, sans dilution
Données d'entrée
Absorbance A260 : 0,5. Type : ADN double brin (dsDNA). Facteur de dilution : 1.
Calcul
Concentration = 0,5 × 50 × 1 = 25 ng/µL.
Résultat
La concentration estimée de cet échantillon est de 25 ng/µL.
Questions fréquentes
Pourquoi le facteur de conversion diffère-t-il entre ADN, ARN et ADN simple brin ?
Chaque type de molécule a une structure et une composition en bases légèrement différentes, ce qui modifie sa capacité d'absorption de la lumière UV à 260 nm par unité de masse. Ces trois facteurs (50, 40 et 33) sont des valeurs empiriques standards établies pour des échantillons purs de chaque catégorie, largement utilisées dans les protocoles de biologie moléculaire.
Que faire si mon échantillon a été mesuré sur un trajet optique différent de 1 cm ?
La plupart des spectrophotomètres de paillasse modernes (type NanoDrop) normalisent automatiquement leur mesure à un trajet optique équivalent de 1 cm avant d'afficher l'absorbance : la valeur lue peut donc être utilisée directement dans ce calculateur. Sur un appareil plus ancien à cuve de trajet différent, il faut d'abord ramener la valeur mesurée à un trajet de 1 cm avant de l'utiliser ici.
Ce calculateur vérifie-t-il la pureté de l'échantillon ?
Non : il calcule uniquement la concentration à partir de l'absorbance à 260 nm, en supposant un échantillon relativement pur. En laboratoire, la pureté se vérifie séparément avec le ratio A260/A280 (autour de 1,8 pour de l'ADN pur, 2,0 pour de l'ARN pur) ; un ratio nettement inférieur suggère une contamination par des protéines ou d'autres résidus, qui fausserait aussi la concentration calculée ici.